TOSOH凝膠色譜柱操作與維護(hù)建議如下：
 

　　一、操作建議
 

　　溶劑與樣品準(zhǔn)備
 

　　溶劑選擇：使用HPLC純?nèi)軇?，必要時過濾去除顆粒物。對于SW系列色譜柱(如G2000SWXL、G3000SWXL)，流動相需與水互溶，如乙腈、甲醇等，避免使用對不銹鋼有腐蝕性的溶劑。
 

　　溶劑脫氣：通過超聲脫氣減少氣泡干擾，防止柱效降低或形成氣室。
 

　　樣品溶解：用流動相溶解樣品，并過濾(如0.2μm或0.45μm濾膜)去除固體顆粒，避免堵塞色譜柱。
 

　　色譜柱安裝與排氣
 

　　安裝步驟：
 

　　拆卸色譜柱入口密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出。若有，直接連接管路；若無，表明柱內(nèi)可能進(jìn)入空氣。
 

　　將色譜柱出口端連接至進(jìn)樣閥，用流動相反方向沖洗(流速0.2mL/min)，直至流出溶劑無氣泡。
 

　　確認(rèn)氣體排盡后，按正確方向連接色譜柱。
 

　　排氣關(guān)鍵：避免溶劑流速過快或壓力驟升，以免降低柱性能。
 

　　運(yùn)行參數(shù)設(shè)置
 

　　流速與柱溫：根據(jù)色譜柱型號(如SW系列建議1.0mL/min)和樣品性質(zhì)設(shè)定流速；柱溫通?？刂圃?0-60℃，需穩(wěn)定在設(shè)定值。
 

　　檢測器參數(shù)：根據(jù)檢測器類型(如UV檢測器)設(shè)置波長等參數(shù)，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
 

　　進(jìn)樣操作
 

　　手動進(jìn)樣：吸取50-100μL樣品溶液，緩慢注入進(jìn)樣口，避免氣泡和漏液。
 

　　自動進(jìn)樣：按儀器界面提示設(shè)置進(jìn)樣體積、速度等參數(shù)，確保重復(fù)性。
 

　　分析后清洗
 

　　清洗溶劑選擇：
 

　　若流動相為緩沖溶液，先用蒸餾水沖洗柱內(nèi)鹽分，再用合適溶劑(如甲醇)沖洗。
 

　　對于SW系列，可用100%甲醇或異丙醇、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑洗脫吸附物質(zhì)。
 

　　清洗時間與流速：根據(jù)污染程度調(diào)整，一般為30分鐘至數(shù)小時，流速0.5-1.0mL/min。
 

　　二、TOSOH凝膠色譜柱維護(hù)建議

 

　　日常維護(hù)
 

　　壓力監(jiān)測：定期檢查柱前后壓力，異常時排查原因(如篩板堵塞、填料污染)。
 

　　基線校準(zhǔn)：每月檢查基線穩(wěn)定性，若噪聲>0.5mAU(UV檢測器)或漂移>0.1mAU/min，需清洗檢測器流通池或更換氘燈。
 

　　泵密封更換：若發(fā)現(xiàn)泵頭滲液、壓力不穩(wěn)定或流速誤差超過±2%，立即更換密封圈，避免漏液損壞設(shè)備。
 

　　長期保存
 

　　短期保存(隔夜或周末)：用不含緩沖鹽的流動相保存，或80%左右有機(jī)相(如甲醇/水=80/20)防止長菌。
 

　　長期保存：
 

　　反相柱：純甲醇或乙腈，或80%有機(jī)相。
 

　　離子交換柱、水性SEC柱：水溶液(加0.05%NaN?防霉)。
 

　　正相柱：無論短期或長期，均推薦保存在所用流動相中。
 

　　標(biāo)簽標(biāo)注：在柱身貼標(biāo)簽，明確保存溶劑和日期，避免誤用。
 

　　再生處理
 

　　適用場景：長期使用后柱效下降(如理論塔板數(shù)低于初始值80%)。
 

　　再生方法：
 

　　有機(jī)物污染：純甲醇或乙腈以0.5mL/min流速沖洗2-4小時。
 

　　鹽沉積或蛋白質(zhì)污染：階梯式?jīng)_洗(50%乙腈+0.1%TFA沖洗1小時→0.1M NaOH溶液沖洗2小時→純水平衡至中性)。
 

　　驗(yàn)證再生效果：注射標(biāo)準(zhǔn)樣品(如聚乙二醇或藍(lán)葡聚糖)，對比再生前后保留時間與峰形。
 

　　防污染措施
 

　　避免交叉污染：不同樣品分析間用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱。
 

　　使用保護(hù)柱：在分析柱前加裝短保護(hù)柱(5-30mm)，攔截雜質(zhì)，延長主柱壽命。
 

　　防止微生物滋生：水性流動相中加NaN?(0.05%)或定期更換溶劑。
 

　　物理防護(hù)
 

　　避免碰撞與震動：防止柱床變干或填料松動。
 

　　溫度控制：室溫保存，避免凍結(jié)(0℃以下)或高溫(>40℃)環(huán)境。