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使用凝膠色譜柱進(jìn)行分離的過(guò)程是什么樣的

更新時(shí)間：2023-09-08瀏覽：1223次

　　凝膠色譜柱也被稱(chēng)為分子篩柱或凝膠過(guò)濾柱，是一種常用的色譜柱，用于根據(jù)分子大小分離和純化樣品中的生物大分子。它基于溶液中大分子與凝膠顆粒之間相互作用的差異來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。TSK GEL HHR系列裝填有粒徑為5μm的苯乙烯二乙烯基苯共聚物填料，該類(lèi)色譜柱又優(yōu)良的溶劑可置換性和耐用性。TSK GEL G2000HHR高使用溫度可到60℃。

　　使用凝膠色譜柱進(jìn)行分離的過(guò)程如下：

　　樣品加載：將待測(cè)樣品以溶液形式加載到色譜柱上，樣品中的生物大分子會(huì)進(jìn)入凝膠顆粒的孔隙中。

　　分離過(guò)程：在柱中，較大的生物大分子由于體積較大而無(wú)法進(jìn)入凝膠顆粒的內(nèi)部，從而通過(guò)柱床快速流出；而較小的生物大分子會(huì)進(jìn)入凝膠顆粒的孔隙中，因此在柱中停留的時(shí)間較長(zhǎng)。

　　提取純化：根據(jù)分子的大小，通過(guò)逐步洗脫柱床，收集到不同分子大小的組分。較大的分子會(huì)首先洗脫，而較小的分子則在較后的洗脫過(guò)程中被收集。

　　凝膠色譜柱的優(yōu)點(diǎn)包括：

　　分子選擇性：通過(guò)調(diào)整凝膠顆粒的孔隙大小和性質(zhì)，可以選擇性地分離目標(biāo)生物大分子。

　　不需高壓：相對(duì)于其他色譜技術(shù)，操作簡(jiǎn)單，無(wú)需高壓。

　　保持活性：由于色譜柱在分離過(guò)程中使用柔軟的凝膠材料，因此生物大分子的活性可以被更好地保持。

　　凝膠色譜柱的填料是由多孔性凝膠顆粒構(gòu)成，這些顆粒可以具有不同的孔隙大小和排列方式，以實(shí)現(xiàn)對(duì)大分子的分離。常用的凝膠材料包括瓊脂糖、聚乙二醇、聚丙烯酰胺等。為了獲得高質(zhì)量的分離結(jié)果，選擇合適的填料材料和柱尺寸非常重要。此外，凝膠柱的操作和儲(chǔ)存應(yīng)遵循生產(chǎn)商提供的說(shuō)明書(shū)或建議，并且對(duì)于每次使用前都應(yīng)進(jìn)行柱的再平衡和校正。

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